تأثیر بذر گیاه خار مریم بر بیان برخی ژن های کبدی مرتبط با سیستم های بیوترانسفورماسیون، آنتی اکسیدانی و ایمنی جوجه های گوشتی تغذیه شده با آفلاتوکسین b1

هدف از انجام این پژوهش بررسی تأثیر بذر گیاه خار مریم بر بیان ژن های کبدی مرتبط با سیستم های بیوترانسفورماسیون cyp1a1) و (cyp2h1، آنتی اکسیدانی sod) و (gpxو ایمنی ) il-2و (il-6 جوجه های گوشتی تغذیه شده با آفلاتوکسین b1 به روش نیمه کمّی بود. طرح این پژوهش بصورت فاکتوریل 3×3 و در قالب طرح کاملاً تصادفی اجرا گردید. تیمارهای آزمایشی شامل دو فاکتور بود. فاکتور آفلاتوکسین در 3 سطح (صفر، 250 و ppb 500) و فاکتور بذر گیاه خارمریم (ماریتیغال)، در 3 سطح (صفر، 5/0 و یک درصد) ، مجموعاً نه سطح ترکیبی و هر تیمار دارای چهار تکرار و هر تکرار شامل شش قطعه جوجه، مجموعاً 216 قطعه جوجه گوشتی نژاد راس 308 بود. جیره های تیمارهای آزمایشی عبارت بودند از؛ 1) شاهد بدون اضافه کردن بذر گیاه خارمریم یا آفلاتوکسین b1، 2) ppb 250 آفلاتوکسین b1 ، 3) ppb 500 آفلاتوکسین b1، 4) 5/0 درصد بذر گیاه خارمریم، 5) 5/0 درصد بذر گیاه خارمریم + ppb 250 آفلاتوکسین b1 ، 6) 5/0 درصد بذر گیاه خارمریم + ppb 500 آفلاتوکسین b1 ، 7) یک درصد بذر گیاه خارمریم، 8) یک درصد بذر گیاه خارمریم + ppb 250 آفلاتوکسین b1 ، 9) یک درصد بذر گیاه خارمریم + ppb 500 آفلاتوکسین b1. نمونه گیری از بافت کبد جوجه ها در سن 35 روزگی دوره پرورش صورت گرفت. بعد از استخراج rna از بافت نمونه ها با استفاده از نانودراپ ارزیابی شدند. سپس نمونه هایی که دارای کیفیت مناسب بودند جهت ساختن cdna مورد استفاده قرار گرفتند. به منظور بررسی بیان ژن های مورد مطالعه، جهت بهینه نمودن شرایط، واکنش pcr انجام گردید. واکنش pcr در حضور یک مخلوط اصلی شامل بافر x10، آغازگرهای اختصاصی، dntp، mgcl2 و آنریم taq برای همه ژن ها صورت گرفت. محصولات واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) جهت مشاهده باندهای تشکیل شده به وسیله هر ژن بر روی دستگاه الکتروفورز قرار گرفتند. تمام نمونه های cdna ابتدا با ژن مرجع house) (keeping ارزیابی شدند. نتایج نشان داد که آفلاتوکسین b1 بیان ژن های sod، cyp1a1 و cyp2h1را افزایش، اما بیان ژن-های gpx و il-6را کاهش داد. بررسی بیان ژن ها در تیمارهایی که آفلاتوکسین b1و بذر گیاه خار مریم را توأمان مصرف کرده بودند نشان داد که بیان ژن های sod و il-6 در آن ها کاهش پیدا کرد. بیان ژن های gpx و sod در تیمارهایی که فقط بذر گیاه خار مریم مصرف کرده بودند افزایش پیدا کرد. اما بیان ژن il-2 تحت تأثیر هیچ کدام از تیمارهای آزمایشی قرار نگرفت.